假设一段基因长度为800bp,现要求对其400位核苷酸进行突变

dollar2018 2024-05-12 18:38:37
最佳回答

这是所谓的定点突变问题。有两种常见方法,通俗说法是搭桥和p圈。

搭桥法

如图,蓝条表示基因全长,红**表示突变位点。设计如图所示的两对引物,primer1和4是基因首尾两端引物,primer2和3有部分重叠(约10多个bp),均引入突变位点。用primer1/2和primer3/4分别pcr得到前后两段的基因片段(由于引物中引入突变,两端产物实际上均是突变后的基因)。然后以这两段pcr产物混合物为模板,primer1/4为引物pcr,即可得到全长的突变基因。


p圈

首先将基因全长连在载体上构成质粒,然后以质粒为模板,用上图中的primer2/3为引物对整个质粒进行扩增。扩增产物主要是突变的基因(pcr产生的新质粒),但同时含有少量没突变的基因(作为模板的质粒)。因为质粒扩增时在eco.li中会有甲基化修饰,所以用dpni酶对pcr产物进行消化就可以破坏模板质粒。消化后的产物转化eco.li扩增就可以得到只含突变基因的质粒。


为了确保突变成功,上述两种方法得到的产物都应该送测序鉴定。

20210311
汇率兑换计算器

类似问答
  • brca1/2基因突变检测多少钱
    • 2024-05-12 08:30:23
    • 提问者: 第五人格Tox
    检测这两个位点来看是不是有乳腺癌风险不准的,引起乳腺癌的位点有好多呢,建议来佳学基因侧,全面一些
  • 核晶苷多少钱一盒啊,核晶苷效果到底怎么样
    • 2024-05-12 07:08:09
    • 提问者: 吕小鹿
    核晶苷含能杀死癌细胞的核酸、外源凝集素、甾醇和脂肪酸和多糖,及人体必需的氨基酸。对肺癌、甲状腺癌、黑色素瘤、胃癌、结肠癌、乳腺癌、**癌等 17 种实体肿瘤有效,是日本多家**疗单位试验结果所证明的。除了日本三重大学**学部之外,日本神户大学农学部、**学部、**兰州中**院、****品生物制检所等机构,也针对姬松茸提取物核晶苷的惊人效果,进行基础、临床实验,在这些研究当中,被证实具有优异效果的,...
  • 核晶苷**怎么样?
    • 2024-05-12 22:46:04
    • 提问者: ᙏ̤̫(ღ小歪ღ)
    为您查询的资料表示:****学肿瘤研究所免疫室研究员吴易元教授:核晶苷抗肿瘤及增强免疫功能主要来自多糖体。以 b-d-葡聚糖和蛋白结合的复合体作用最强,对 s18细胞、t 细胞、b 细胞及自然杀伤细胞等免疫细胞的活性增强,促使免疫细胞分泌相关的细胞因子如干扰素,细胞坏死因子等,达到提升**之目的,目前在日本倍受瞩目。如果能帮到你加分哦…^x
  • 美度手表为什么要进行洗油保养
    • 2024-05-12 01:08:03
    • 提问者: 猫小君 ?
    因为任何机械表,用久了,本来的润滑油都会慢慢干,轴与轴眼(宝石)都会有不同程度的损耗,然后就是一个直接的效果就是有研磨出来的细屑等,还有金属与金属也会运作久了也会产生这些,这些脏增加了摩擦阻力,最后影响了手表走时及性能,所以定时要洗洗润滑
  • 贝因美第一介段婴儿奶粉多钱400克的
    • 2024-05-12 16:53:44
    • 提问者: Phot Me
    您好,您可以在贝因美妈妈购官方旗舰店进行贝因美奶粉价格的查询和产品的选择贝因美祝您宝宝健康成长!
  • 哪些女性需要做乳腺癌brca1/2基因突变检测
    • 2024-05-12 23:58:29
    • 提问者: Wedding Bus 官方
    佳学基因专注于基因检测和基因解码。佳学基因研究表明,很多疾病的发生与有关,基因决定了疾病的发生,以及症状,预后等等。因此可以通过佳学基因肿瘤风险或者重大疾病基因解码,科学评估疾病的发生风险,提前预防,避免疾病的发生。因此,越早做佳学基因检测越好。
  • 请问核苷酸是什么意思?
    • 2024-05-12 06:14:42
    • 提问者: 田小豆短剧
    核苷酸是核糖核酸及脱氧核糖核酸的基本组成单位,是体内合成核酸的前身物。核苷酸是一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。戊糖与有机碱合成核苷,核苷与磷酸合成核苷酸,4种核苷酸组成核酸。核苷酸主要参与构成核酸,许多单核苷酸也具有多种重要的生物学功能。在生物体内,核苷酸可由一些简单的化合物合成。这些合成原料有天门冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、一碳单位及 co2等。核苷酸是核酸的基本...
  • 因为要写一篇关于(企业)价值观对企业管理作用的文章,现求一段类似性质的古文,即思想影响行动的古文事例
    • 2024-05-12 13:17:47
    • 提问者: 战前女神?
    宋襄公的故事即可~
  • **磺酸和**苯磺酸什么区别?
    • 2024-05-12 11:24:22
    • 提问者: 陈心心
    呵呵,苯环上有三个不同的位置,临位,间位,对位。氨基可以在磺酸基的临位,间位,对位。**苯磺酸是其中的一种。
  • 样本未检测到egfr基因突变说明什么
    • 2024-05-12 04:46:22
    • 提问者: 中山~吖柏
    说明表皮生长因子受体(egfr)基因没有发生突变,是正常的,仅此而已~
汇率兑换计算器

热门推荐
热门问答
最新问答
推荐问答
新手帮助
常见问题
房贷计算器-九子财经 | 备案号: 桂ICP备19010581号-1 商务联系 企鹅:2790-680461

特别声明:本网为公益网站,人人都可发布,所有内容为会员自行上传发布",本站不承担任何法律责任,如内容有该作者著作权或违规内容,请联系我们清空删除。