基因检测一代测序和二代测序区别是什么?

晋城微生活 2024-05-18 23:30:51
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一代测序
第一代测序技术采用的是双脱氧终止法,又叫sanger法。sanger法测序的原理是:利用dna聚合酶对测序模板进行延伸(测序),测序反应中加入荧光标记的双脱氧核苷三磷酸(ddntp)替代脱氧核苷三磷酸(dntp)合成,但是ddntp使得测序反应无法进行下一步的延伸,这就导致在序列的不同位置形成终止,使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点,但终止在测序模板不同的核苷酸上,再通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段,由于不同片段的终止碱基所携带的荧光标记不同,就可以基于荧光,识别终止处的序列。二代测序
二代测序,又叫高通量测序技术(high-throughput sequencing,hts)是对传统 sanger 测序(称为一代测序技术)**性的改变,一次能对成千上万,甚至几百万条核酸分子进行序列测定,因此又称为下一代测序技术(next generation sequencing,ngs)。二代测序有很多种,其中主要有3种,分别是roche/454,illumina/h**eq,abi/solid。但由于测序技术十几年来的飞速发展,在巨大的竞争之后,目前市面上的测序仪,主要是illumina/h**eq 系列。一代测序和二代测序的差别
由于一代和二代测序有很多的区别,可以从如下4个方面来进行比较:
1.测序长度
一代测序的长度比较长,能达到700bp以上。而二代测序的测序长度普遍比较短,主要在300bp以下。2.测序精度
一代测序的精度比较高,主要是由于测序底物量比较大,信号较强,二代测序,由于采用的都是微芯片,测序信号的识别位点比较小,在测序精度方面较一代稍微差一些。3.测序通量
一代测序的通量比较小,仪器一次最多能对384条序列进行测序,而二代测序的通量普遍都比较大,一次测序,能对几十万,几百万的序列进行测序
4.测序成本
由于二代测序技术一次能对几百万条序列进行测序,平均到每次测序的成本较一代测序低的多得多 20210311
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