**苯酯的主要用途

Star土耳其旅游 2024-05-14 14:05:04
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用**苯酯(pitc)与待分析多肽的n-端氨基在碱性条件下反应,生成苯氨基**(ptc)的衍生物,然后用酸处理,关环,肽链n-端被选择性地切断,得到n-端氨基酸残基的噻唑啉酮苯胺衍生物。接着用**将该衍生物萃取出来,酸作用下,该衍生物不稳定,会继续反应,形成一个稳定的苯基乙内酰硫脲(pth)衍生物。余下肽链中的酰胺键不受影响。通过用hplc或电泳法分析生成的苯乙内酰硫脲(pth-氨基酸),可以鉴定出是哪一个氨基酸。每反应一次,结果是得到一个去掉n-端氨基酸残基的多肽,剩下的肽链可以进入下一个循环,继续发生降解。以上方法已经可以自动化。用根据此原理设计出的自动分析仪进行分析时,能够可靠地测定肽链的30个左右氨基酸残基序列,最多可以分析50-60个氨基酸残基。在最好的条件下,每形成一次pth-氨基酸,效率可保持在99%以上。而且此法用量少,一般只用10-100皮摩尔的多肽即可测定氨基酸序列。对于肽链较长的多肽,可以先将肽链切断成多个小肽,对这些小肽进行氨基酸分析,然后将这些信息拼接起来,得到起始肽链中的氨基酸序列。由于edman降解是以化学试剂对n-端氨基的修饰为基础的,因此当n-端被其他化学基团所封闭时,就需要先去除这些基团,然后才能进行测序。此外,蛋白质中含有半胱氨酸残基时,有时两个半胱氨酸残基会发生二硫键交联。这种情况下,需要先用过酸将二硫键氧化为–so3h,然后才能用edman降解测定序列。 20210311
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