大肠杆菌的检测方法

傅佰萬 2024-05-27 18:25:57
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饮用大肠杆菌及检测方法一、乳酵实验(初发酵实验)与试乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g,猪胆盐5g,乳糖10g,0.04%溴甲酚紫水溶液25ml,蒸馏水1000ml,ph7.4。(乳糖胆盐培养基取30g,溶于1000ml纯水中即可)操作步骤1:将配制好的培养液,分装于每管10ml,共装9个试管,并各放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。2:水样稀释(1)无菌操作取水样1ml放于含9ml的灭菌生理盐水中,置于容量瓶中,震荡摇匀为1:10的稀释液。取上述稀释液1ml,注入9ml灭菌生理盐水,震荡摇匀,为1:100的稀释液。(2)取水样,1:10稀释液,1:100稀释液各1ml接种到乳糖胆盐发酵管中。(根据检样的污染程度可以适当调整稀释的比例)每一稀释度接种三管。3:将试管连同试管架放入培养箱中37℃左右培养24h。产酸溶液会由紫色变为黄色,产气发酵管中会有气泡。如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则报告大肠杆菌群阴性,如有产气管,就需要进行分离培养,即进行伊红美蓝培养基鉴别实验。二、伊红美蓝培养基鉴别实验(接种实验)伊红美蓝琼脂(emb)成分:蛋白胨10g,乳糖10g,磷酸氢二钾2g,琼脂17g,2%伊红溶液20ml。0.65%美蓝溶液10ml,蒸馏水1000l,ph7.1.制法:将蛋白胨,**和琼脂溶解于蒸馏水中,校正ph,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min,备用。临用时加入乳糖,并加热融化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红美蓝溶液,摇匀,倾注平板。操作步骤1称量:准确称取各成分。2溶化:加热熔化,定容。3调 20210311
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