sod酶的活力的测定

丁小裘 2024-05-25 04:43:24
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实验材料与方法1主要试剂的配1.0.05mol/l磷酸缓冲液(pbs,ph7.8):a母0.2mol/l磷酸氢二液:取na2hpo4·12h2o(分子量358.14)71.7g;b母液:0.2mol/l磷酸二氢钠溶液:取nah2po4·2h2o(分量156.01)31.2g。分别用蒸馏水定容到1000ml。0.05mol/lpbs(ph7.8)的配制:分别取a母液(na2hpo4)228.75ml,b母液(nah2po4)21.25ml,用蒸馏水定容至1000ml。2.130mmol/l甲硫氨酸(met)溶液:称1.9399gmet用磷酸缓冲液定容至100ml。3.750µmol/l氮蓝四唑溶液:称取0.06133gnbt用磷酸缓冲液定容至100ml,避光保存。4.100µmol/ledta-na2溶液:称取0.003721gedta-na2,用磷酸缓冲液定容至1000ml。5.20µmol/l核黄素溶液:称取0.00753g核黄素用蒸馏水定容至1000ml,避光保存。6.k2cr2o7溶液的配制:m(k2cr2o7)×所要配制的浓度/2m(cr)7.5%双氧水溶液:取30%的双氧水溶液25ml于200ml量筒中,加蒸馏水至150ml。现用现配。8.nahs溶液的配制:精确称取0.056gnahs,少量水溶解并使用容量瓶定容到100ml,定容后的溶液即为10mmol/l的h2s母液,在每次实验前现用现配,并使用蒸馏水稀释成实验所需的浓度。2生理指标的测定(1)酶活性测定的和原理方法:本实验采用氮蓝四唑(nbt)光化还原法原理::氮蓝四唑在蛋氨酸和核黄素存在条件下,照光后发生光化还原反应而生成蓝色甲腙,蓝色甲腙在560nm处有最大光吸收。sod能抑制nbt的光化还原,其抑制强度与酶活性在一 20210311
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