罗氏核酸201hiv检测范围下限是多少拷贝

李政 2024-05-30 04:58:25

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现在很多恐友**hiv核酸（病载）检测。那么今天就来说说这个hiv核酸检测。核酸检测：hivrna基因诊断（检测病毒遗传物质，如pcr）hiv核酸检测有定性和定量两类，前者用于hiv感染的辅助诊断，后者常用于监测hiv感染者的病程进展和抗病毒治疗效果。常用方法：pcr、套式或巢式pcr、逆转录pcr基本原理：在体外条件下（至少1对dna引物，dntp，缓冲液）dna聚合酶催化合成与模板dna互补的新链。意义：病毒核酸阳性一般可作为诊断病毒感染的依据，但对有些病毒（如巨细胞病毒，**病毒，乙肝病毒），不能说明宿主感染状态，如急性、慢性或携带。由于pcr的敏感性非高常，实验条件要求严格，根据pcr试验结果有时尚不能确定病毒或现疾病的关系，该技术在检测不同标本，诊断不同病毒性疾病中的意义有待进一步评价。hiv rna基因pcr检测评价：优点：敏感、特异，是目前使用的病毒学诊断技术中最敏感的技术方法；一次可检测较大量标本；能检测出与宿主细胞基因组整合的病毒核酸序列；可用于检测目前不能或不易分离的病毒。缺点：对诊断未知病毒的感染无能为力，被检测的病毒核酸序列必须已经清楚；需要较多仪器设备，试验成本较高；有试验污染的可能性。其定性检测通常根据扩增产物的电泳图像判定结果，阳性结果还要进行核酸序列测定来确定：1、hiv核酸检测阴性, 只可报告本次实验结果阴性，不可排除hiv感染；2、hiv核酸检测阳性, 可作为诊断hiv感染的辅助指标，不单独用于hiv感染的诊断；3、报告核酸定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。关于定量检测：1、按照仪器读数报告结果，应注明使用的试验方法、样品种类和样品量；2、测定结果小于最低检测限时，应注明最低检测限水平。注意低于最低检测限的结果不能排除hiv感染；3、应附上仪器打印的数据。读到这里有人要问了，为什么那么贵而且很多医生都说好的核酸为什么不能单独确诊**不能排除**了？我们先讲下**病毒的分型。**病病毒主要分为两型：hiv-1型和hiv-2型，它们又有各自的亚型。不同地区流行的亚型不同，同一亚型在不同地区也存在一定差异。包括我国在内，全球流行的主要毒株是hiv-1。hiv-2主要局限于西部非洲和西欧，北美也有少量报告，传染性和致病性均较低。也就是说hiv-1这种病毒比hiv-2更可怕，传染性更强，致死率更高。hiv-1和hiv-2的氨基酸序列同源性约40%～60%。hiv是一种变异型很强的病毒，尤以env基因变异率最高，根据env基因核酸序列差异性，hiv-1分为3个亚型组13个亚型：m亚型组包括a、 b、c、d、e、f、g、h、i、j和k共11个亚型。n亚型组只有n亚型。o亚型组只有o亚型。各亚型env基因核酸序列差异性平均为30%。hiv-2至少有a、b、c、d、e、f、g7个亚型，我国以hiv-1为主要流行株。已发现的有a、b（欧美b）、b′（泰国b）、c、d、e、f和g8个亚型，还有不同的流行重组型。1999年起在部分地区发现并证实我国有少数hiv-2型感染者。我们知道hiv病毒进入人体后病毒的繁殖情况是和病毒的适应性和不同宿主差异有关，据《新英格兰医学杂志》上刊文报道患hiv-1和hsv-2双重感染的妇女中，抗hsv治疗与伐昔洛韦可降低血液和生殖道分泌物中的hiv-1rna水平，因此就不容易检测到hiv核酸。此外服用肝炎类的抗病**物以及抗逆转录酶类的药物均会不同程度降低血液中hiv病毒核酸水平。另有极少数的人即使感染hiv，不需服药就能够将体内病毒数控制到50（拷贝/毫升）以下，这些人通常也不能通过核酸检测判断hiv感染。aware天猫病毒载量实验的关键步骤是探针(信号扩增)或引物(靶扩增)与hiv-1 rna的杂交，亚型变化而导致的基因差异能够使hiv-1rna的定量出现低效或错误。有些方法定量测定非b亚型，特别是a、g亚型时，有明显的低估现象。hiv-1亚型在世界各地的分布是不均衡的，如果要依据hiv-1rna的绝对水平做出临床决定，应将所有的亚型同等地进行定量，注意同等检测不等于同等定量，因为关键部位的引物错配可能并不完全使扩增停止，但是能够显著降低扩增的效率。有报道表明，目前所用的几种用于检测核酸的试剂盒，在检测非b亚型hiv-1感染者时，或者不能检测到，或者不能正确定量病毒量。对hiv-2型和hiv-1的o组尚不能定量检测其病毒rna。这里先做一个小结。众所周知，**病为什么难以治疗的原因之一是其基因具有高度变异性。而核酸检测被检测的病毒核酸序列必须已经清楚。那么是否会出现一种现在试剂未包含的病毒核酸序列而漏检？加上上面说的，虽然核酸假阴可能很小，但是却不能排除。却是致命的缺点。 20210311

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