色谱分析中的系统适用性实验包括哪些?

杨六岁 2024-05-27 05:48:52
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色谱系统的适用性试验通常包括理论板数、**度、重复性和拖尾因子等四个指标。其中,**度和重复性是系统适用性试验中更重大的参数。按各品种项下要求对色谱系统进行适用性试验,即用规定的对照品溶液或系统适用性试验溶液对色谱系统进行试验,必要时,可对色谱系统进行适当调整,应适合要求。。(1)色谱柱的理论板数(n) 用于评价色谱柱的效用。由于不同物资在同一色谱柱上的色谱行径不同,采用理论板数作为衡量柱效用的指标时,应指明测定物资,一般为待测组分或内标物资的理论板数。在规定的色谱条件下,注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物资溶液,记录色谱图,量出供试品主成分峰或内标物资峰的保留时间tr(以分钟或长度计,下同,但应取相同单位)和峰宽(w)或半高峰宽(wh/2),按n=16(tr/w)2 或n=5.54(tr/wh/2)2 计算色谱柱的理论板数。(2)**度(r) 用于评价待测组分与相邻共存物或难**物资之间的**水平,是衡量色谱系统效用的主要指标。杂质检验的方法选择时,可以通过测定待测物资与已知杂质的**度,也可以通过测定待测组分与某一添加的指标性成分(内标物资或其余难**物资)的**度,还可以将供试品用适当的方法降解,通过测定待测组分与某一降解产物的**度,对树立的色谱系统进行评价与节制。无论是定性鉴别还是定量剖析,均要求待测峰与其余峰、内标峰或特定的杂质对照峰之间有较好的**度。除另有规定外,待测组分与相邻共存物之间的分离度应大于1.5;或通过验证,待测组分与指标性成分之间的**度应大于某一规定值。**度的计算公式为:r=2(tr2-tr1)/(w1+w2) 或r=2(tr2-tr1)/1.70(w1, h/2+w2, h/2)式中 tr2 为相邻两峰中后一峰的保留时间; tr1 为相邻两峰中前一峰的保留时间; w1 及w2 为此相邻两峰的峰宽(如图)。当对测定结果有歧义时,色谱柱的理论塔板数(n)和**度(r)均以峰宽(w)的计算结果为准。(3)重复性 用于评价连续进样后,色谱系统响应值的重复性能。采用外标法时,通常取各品种项下的对照品溶液,连续进样5 次,除另有规定外,其峰面积测量值的相对尺度错误应不大于2.0%;采用内标法时,通常配制相当于80%、100%和120%的对照品溶液,加入规定量的内标溶液,配成3 种不同浓度的溶液,离别至少进样2 次,计算平均校正因子。其相对尺度错误应不大于2.0%。(4)拖尾因子(t) 用于评价色谱峰的对称性。为保障**效果和测量精度,应检验待测峰的拖尾因子是否适合各品种项下的规定。拖尾因子计算公式为: t=w0.05h/2d1式中w0.05h 为5%峰高处的峰宽;d1 为峰顶点至峰前沿之间的距离。除另有规定外,峰高法定量时t 应在0.95~1.05 之间。峰面积法测定时,若拖尾严重,将影响峰面积的准确测量。必要时,可依据情况对拖尾因子作出规定。 20210311
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